Alessandra Mussolini syntyi vuonna 1962. Hän valmistui cum laude lääketieteen ja kirurgian kandidaatiksi Rooman yliopistosta. Hän on Rooman lääkärien ja kirurgien kollegion jäsen. Hänet valittiin ensimmäisen kerran vuonna 1992 Italian parlamentin edustajainhuoneeseen, ja hänet valittiin uudelleen vuosina 1994, 1996 ja 2001. Hänet valittiin uudelleen Italian edustajainhuoneeseen vuonna 2008, jolloin hän toimi lapsuus- ja nuorisovaliokunnan puheenjohtajana. Vuonna 2013 hänet valittiin Italian tasavallan senaattiin ja neuvoston puheenjohtajavaltion sihteeriksi. Poliittisen uransa aikana hänet valittiin kahdesti Napolin kaupunginvaltuutetuksi, Latinan maakunnan valtuutetuksi ja Campanian alueen valtuutetuksi. Euroopan parlamentin jäsen vuosina 2004-2008, 2014-2019 ja vuodesta 2022.